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时间分辨荧光免疫层析技术平台


 

 

 

什么是时间分辨荧光免疫测定技术?

时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时体育娱乐网址平台波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。


时间分辨荧光免疫分析原理

在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光体育娱乐网址平台的灵敏度就会严重下降。大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化。

 

时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析。荧光分析利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响,同时,荧光分析与普通分光不同,光电接受器与激发光不在同一直线上,激发光不能直接到达光电接受器,从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度。

但是,当进行超微量分析的时候,激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此,解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。

解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短(10-100ns),激发光消失,荧光也消失。不过有非常少的稀土金属(EuTbSmDy)的荧光寿命较长,可达12ms,能够满足测量要求,因此而产生了时间分辨荧光分析法,即使用长效荧光标记物,在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。


时间分辨信号原理

平时常用的镧系元素主要是Eu(铕)和Tb(铽),Eu荧光寿命1ms左右,在水中不稳定,但加入增强剂后可以克服;Tb荧光寿命1.6ms,水中稳定,但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解,因此从测量方法学上看Tb很好,但不适合用于生物分析,故Eu最为常用。


 


铕的荧光寿命可达1ms左右,体育娱乐网址平台中只要在每个激发光脉冲过后采用延缓测量时间的方式,待短寿命(10-100ns)的背景荧光衰变消失后,再打开取样门仪光源体育娱乐网址平台,这样就可以完全避免本底自身所带背景荧光的干扰,大大提高了体育娱乐网址平台的特异性,每一秒钟体育娱乐网址平台样品1000次,结果取平均值,有利于提高体育娱乐网址平台的准确性。 

时间分辨免疫层析


波长分辨原理

普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响体育娱乐网址平台结果的准确性。

铕的激发光波长340nm,发射光波长613nm,两者之间的波长差即Stokes位移为273nm,所以激发光和发射光很容易用干涉滤光片分开。 





我们的合作


光景生物在定量即时体育娱乐网址平台技术和感染控制技术的应用开发领域同美国金佰利-克拉克(Kimberly-Clark)公司形成战略合作伙伴,是全球唯一合法使用时间分辨荧光免疫层析技术平台的企业。


专利号:ZL 03 8 19391.4


纳米微球技术

光景生物在传统时间分辨技术基础上,采用独家专利纳米微球技术,将成千上万个Eu3+包埋在纳米微球里面,再与抗体结合,相比普通的时间分辨,既解决了Eu3+在水中不稳定的问题,又可以将荧光信号放大上万倍,从而大大提高体育娱乐网址平台的灵敏度。

 

光景生物纳米微球专利技术


专利号:ZL 2010 1 0116206.2




光景生物纳米增强时间分辨技术部分项目与大型化学发光比对结果: